嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法，已在血液系统恶性肿瘤治疗中实现突破性进展，但传统CAR-T细胞疗法流程复杂、成本高、可及性低等痛点，严重限制其临床普及。而新一代In vivo CAR-T技术通过靶向递送系统，将CAR编码元件直接导入患者体内T细胞，完成原位基因编辑与功能重塑，重构了CAR-T的生产模式。这一技术革新不仅解决了传统疗法的固有缺陷，更拓展了CAR-T在实体瘤及自身免疫病领域的应用边界。
图1 传统CAR-T(Ex vivo CAR-T)与In vivo CAR-T(In situ CAR-T)生产模式对比
（图片来源：Int J Mol Sci. 2023 Oct 28;24(21):15688.）
相较于传统CAR-T疗法，In vivo CAR-T疗法通过T细胞趋向性慢病毒、CD8+T细胞靶向LNP等靶向递送系统，将CAR编码元件（DNA/mRNA）精准递送至患者体内内源性T细胞，经载体介导的基因转导或胞内释放，完成CAR的转录翻译与表面表达，实现T细胞功能改造；改造后的CAR-T细胞可特异性识别肿瘤/病变细胞抗原，激活杀伤活性以实现靶向清除。
该疗法省去“体外采集-基因改造-扩增-回输”的复杂流程，仅需单次注射即可启动治疗，大幅缩短治疗周期，既降低对自体T细胞质量的依赖、拓宽适用人群，又能规避传统疗法清淋预处理引发的感染等多重安全风险。
当前，国内外药企的In vivo CAR-T疗法，已纷纷进入临床研究阶段。在此趋势下，药康生物不仅可供应高质量免疫系统人源化小鼠模型，更搭建了适配In vivo CAR-T疗法的非临床前药效评价体系，既能精准化、系统化评估其疗效，还可验证非临床前的体内基因编辑效率及CAR表达效果，为新药研发进程提速。
数据分享
人源PBMC重建NCG-MHC-dKO小鼠体内药效评价
实验流程：将Nalm6-Luc肿瘤细胞尾静脉接种于NCG-MHC-dKO小鼠，腹腔注射2×107 PBMC后，腹腔注射给予抗CD19-CAR慢病毒载体（图2A）；通过流式检测人T细胞的CAR表达以确认体内编辑成功（图2E），借助活体成像监测肿瘤负荷（图2B）。
图2 In vivo CAR-T在huPBMC-NCG-MHC-dKO小鼠中的药效评价（合作验证数据）
如图2所示：该模型中In vivo CAR-T治疗组对Nalm6-Luc肿瘤呈现显著生长抑制，治疗组生存期延长；对照组无抑瘤效果，进一步验证了药物有效性（图2C和图2D）；同时，治疗组检测到人T细胞的CAR表达（图2E）。
人源HSC重建huHSC-NCG小鼠体内药效评价
以UB-VV100载体（治疗B细胞恶性肿瘤的临床候选药物，编码CD19-CAR）的评价为例：在该模型中，腹腔注射给予不同剂量的UB-VV100后，流式检测显示B细胞呈剂量依赖性清除（图3B），且CAR-T细胞比例随载体剂量升高而增加（图3C）。该模型可有效评估CAR-T药物的靶向清除功能和体内动力学行为。同时，该模型也可结合CDX/PDX模型，拓展至其他非B细胞靶点药效评价测试。
图3 In vivo CAR-T在huHSC-NCG小鼠中的药效评价
（图片来源：J Immunother Cancer. 2023 Mar;11(3):e006292.）
In vivo CAR-T技术正推动细胞治疗完成从“复杂定制化工程”到“便捷通用型药品”的跨越，是下一代免疫治疗的核心发展方向之一。但这一技术的临床转化，高度依赖临床前研究对其在复杂人体环境中行为的精准预测。
目前，国内部分优质CRO企业，可为相关研究提供精准人源化小鼠模型。比如药康生物构建的免疫系统人源化模型，为研究In vivo CAR-T药物的有效性、持久性及安全性研究，提供了系统、可靠且高效的非临床评价载体；同时，药康生物还可提供非临床前药效评价的一站式服务，从模型供应到数据产出全流程支持，助力In vivo CAR-T疗法的研发与转化进程加速。
附表：
